载体构建
K8凯发生物科研服务平台可为基因功能研究者提供前沿、全面、严谨的载体设计和载体构建服务,内容涵盖普通真核表达载体、病毒载体等。
病毒载体构建服务包含慢病毒、腺相关病毒、腺病毒和逆转录病毒载体等,构建内容包括基因过表达载体构建、基因定点突变表达载体构建、用于基因沉默的shRNA设计与构建、microRNA表达与封闭载体设计与构建、萤光素酶报告基因载体构建(UTR、启动子及其它功能序列)以及Cre-LoxP系统和CRISPR/Cas9基因编辑工具载体设计与构建等,力求一站式解决基因功能研究中的基因上调和基因下调需求。
质粒优势:
表达时间快,导入细胞后约24小时可观察到目的基因表达;
构建技术简单,成本低。
K8凯发的过表达载体库丰富,并且过表达的标记丰富
荧光标记:GFP、mCherry、CFP、BFP、EYFP、mNeonGreen、tdTomato、 mScarlet…
标签标记: FLAG、 HA 、Myc、His tag…
抗性标记:Puro、Neo、Hygro、BSD…
局限性:
转染试剂具有细胞毒性,使用后影响细胞状态;
大部分细胞较难转染,达不到基因操作目的;
质粒不整合到细胞基因组,只能进行短时间的瞬时表达,无法进行观察周期较长的实验。
由于单纯质粒存在一定的局限性,根据实验需要需包成病毒进一步满足不同实验的需求。
不同表达载体的区别